1ère étape : obtention du plasmide recombinant
1ère étape : obtention du plasmide recombinant
Etape 2 : la transformation
Etape 2 : la transformation
Etape 3 : sélection des bactéries transformées
Un plasmide recombinant correspond à l'insertion d'un fragment d'ADN dans un vecteur
Quels sont les principaux outils de biologie moléculaire utilisés lors de cette étape ?
Votre réponse :
Enzymes de restriction, Lyase, ADN Ligase, Cosmide, Plasmide
Réponse attendue :
Enzymes de restriction, Lyase, ADN Ligase, Cosmide, Plasmide
L'enzyme de restriction permet de linéariser le plasmide et confère à l'ADN à insérer des extrémités identiques à celles du plasmide. Ainsi l'ADN étranger et le plasmide peuvent s'hybrider par complémentarité, entraînant ainsi leur soudure par l'ADN ligase.
La transformation correspond à l'insertion du plasmide recombinant dans une bactérie (plus généralement une cellule hôte).